1. 研究目的与意义
现今随着人口年龄增长、生活习惯、饮食习惯不规律等因素的影响，骨质疏松发病率逐年上升，且发病年龄有明显提前的趋势。
因此，骨质疏松症越来越受人们的关注。
在正常人的骨骼中，破骨细胞和成骨细胞的功能处于一种动态平衡状态，使骨组织不断更新。
2. 文献综述
破骨细胞分化及功能相关指标研究进展丁春霞摘要 破骨细胞是一种多核的，具有骨吸收功能的骨组织细胞。
其来源于特定的破骨细胞前体，在到达骨膜后分化融合成成熟的破骨细胞，在骨吸收的过程中起着至关重要的作用。
在正常人的骨骼中，骨组织的更新处于一种动态平衡状态，当破骨细胞的骨吸收异常时，这种平衡就会被破坏，导致骨的丢失，引起一系列临床病症，如骨质疏松等。
3. 设计方案和技术路线
方案：1.细胞培养：DMEM完全培养液培养RAW264.7细胞，并定期换液，或是从小鼠四肢长骨中剔出骨髓，静置后取出细胞悬液，加入培养液进行传代培养；2.构建破骨细胞分化模型：上述培养细胞用不同浓度LPS培养不同时间，利用TRAP染色观察获得破骨细胞分化最佳参数；3.细胞实验分组：分为5组，分别是溶剂组、模型组以及DSS不同药物浓度给药组，将细胞分装至对应的孔板中，使之适应环境一天，于第二天同一时间给药，隔两天再一次给药，两天后取出，利用MTT法测定细胞活力获得不同给药浓度；4.测量相关分化指标：按照上述给药方法给药，取出，并检测TRAP活性，组织蛋白酶K和NFATc1的表达水平；5.记录并整理实验数据，分析数据，判定当归芍药散是否对脂多糖诱导的破骨细胞分化成熟有抑制功能。
技术路线图（附件中）
4. 工作计划
第一阶段（2022.1）：查阅文献，并按照要求制定实验方案，培养细胞；第二阶段（2022.2~3）：建立适宜的破骨细胞分化模型；第三阶段（2022.3）：利用MTT法确定当归芍药散适宜给药浓度范围；第四阶段（2022.4~5）：分组实验，并检测破骨细胞相关分化指标，及时记录实验数据；第五阶段（2022.6）：整理数据，撰写论文
5. 难点与创新点
当归芍药散在临床上利用肝脾论治的理论治疗骨质疏松，体现中医治疗的整体性。
本研究从破骨细胞分化的角度，探讨当归芍药散通过该途径改善骨质疏松的机制。
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