1. 研究目的与意义
内容:1、从ScFv-Var5(抗血管紧张素)菌体的包涵体入手,介绍整个蛋白纯化工艺。
2、说明此次实验主要研究四步:高压破菌(压榨)→洗涤→溶解→Ni层析。
3、列出每一步需要用到仪器与型号、各种所需条件,并附上实验结果(电泳图)以供比较。
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2. 文献综述
文献综述重组抗血管紧张素受体单克隆抗体改构体融合蛋白的原核表达研究【摘要】:传统的蛋白大都不能够正确的折叠而以包涵体的形式存在于沉淀中,不能在原核系统中表达,我们此次实验的重组抗血管紧张素受体单克隆抗体改构体融合蛋白(SU-ScFv-var5)可在原核表达系统中表达。
运用单克隆抗体技术可以得到纯度较高、特异性强的抗体,以此可以提高各种血清学方法检测抗原的敏感性及特异性,这项技术的应用大大促进了对各种传染病和恶性肿瘤诊断的准确性。
【关键词】:单克隆抗体、单链抗体 、重组蛋白 、SUMO融合表达1、 单克隆抗体一般抗原以异源蛋白居多,通常情况下免疫系统能够识别抗原上面的多个位点,针对不同的位点会特异性的产生针对该位点的抗体来结合抗原,由此产生的抗体集合我们称之为多克隆抗体。
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3. 设计方案和技术路线
菌体破菌→破菌后离心→包涵体洗涤→包涵体溶解→过Ni柱→复性
4. 工作计划
2022年3月1-8号:查阅SU-ScFv-var5相关资料撰写开题报告2022年3月9号-4月30号:做课题的实验2022年5月1-7号:整理分析相关实验数据2022年5月8-31号:撰写论文
5. 难点与创新点
在本实验中,我们使用SUMO酶因其含有的6个组氨酸能与Ni亲和,以便特异性识别。
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