1. 研究目的与意义
1 atp6v1ba基因简介
1.1atp6v1ba基因的结构
斑马鱼的atp6v1ba基因是6型atp酶的一个亚基，人的体内有多种类型的atp酶，并且包含各种atp酶基因，这些atp酶基因控制着人体内的各种生命活动以及物质的转运，包括钠/钾离子转运、钙离子转运、镁离子转运、氢/钾离子转运、线粒体中的氢离子转运、溶酶体中的氢离子转运、铜离子转运，除此之外，还有I型，第8类、II型，第9类、V型，第10类、VI型，第11类、非胃中的氢/钾离子转运以及第13类的atp酶基因。V型ATP酶广泛存在于细胞内膜系统，如溶酶体、内膜体、高尔基体、分泌颗粒等，V-ATP酶水解ATP，建立跨膜质子电化学梯度（△￣μＨ￣＋），酸化细胞内外环境。研究证明△￣μＨ￣＋和酸化作用为细胞的内吞、外泌、膜流和物质转运等生理生化反应提供了必需的条件[1]。
2. 研究内容和问题
研究内容：构建atp6v1ba的原位杂交特异性探针，原位杂交分析不同发育阶段atp6v1ba基因在斑马鱼（AB）胚胎中的表达量及表达组织特异性，并研究基因沉默对斑马鱼血管发育过程的影响。
研究目标：明确atp6v1ba基因的表达特异性，及其与血管发育间的关系，并通过基因沉默，分析其对血管发育过程的影响。为生理或病理情况下血管发育的调控提供借鉴。
拟解决的关键问题：atp6v1ba基因在斑马鱼（AB）胚胎血管发育中的生理活性。3. 设计方案和技术路线
研究方法：
特异性探针原位杂交测定atp6v1ba基因在斑马鱼发育过程中的特异性表达位置；
Mo注射沉默atp6v1ba基因在斑马鱼中的表达，观察该基因在斑马鱼发育过程的特异性作用；
4. 研究的条件和基础
学生已经了解原位杂交的基本实验原理及技术，了解激光共聚焦显微镜的工作原理。熟悉专业论文的写作方法。
实验设备齐全：
本课题组有成熟的原位杂交实验体系，并具有完善的斑马鱼养殖系统，以及激光共聚焦显微镜完成发育和表达的图像采集和分析，可以按计划完成相应的实验内容。
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