β-半乳糖苷酶在毕赤酵母中的异源表达及酶学性质研究开题报告

 2023-04-18 09:32:29

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

1. 低聚糖1.1 什么是低聚糖糖类化合物作为自然界中数量众多、分布广泛的有机化合物,它不仅可以作为生命活动所需的能量载体、为生物体合成提供原料,而且糖类化合物中储存有大量生物信息,被视为高密度信息载体。

存在形式低聚糖是指含有2-10个糖苷键聚合而成的化合物,糖苷键是一个单糖的苷羟基和另一单糖的某一羟基脱水缩合形成的。

它们常常与蛋白质或脂类共价结合,以糖蛋白或糖脂的形式存在[1]。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

研究问题:为克服现有的酶合成或细胞合成低聚半乳糖的不足之处,以表达外援蛋白很强的毕赤酵母(Pichia pastoris GS115)为出发菌株,通过分子生物学的基本方法,构建一株能自身合成β-半乳糖苷酶的新菌株,使该菌株可利用该酵母细胞合成低聚半乳糖。

拟采用的研究手段:1.米曲霉基因组的获取及其PCR扩增在NCBI网站上找到相关的锚定蛋白基因序列,使用软件snapgene设计引物。

以提取的酿酒酵母基因组为模板,使用KOD高保真DNA聚合酶分别对预测得到的各个潜在的锚定蛋白的基因进行PCR扩增获得目的基因片段。

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