1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
黄曲霉毒素（Aflatoxins, 简称AFT）是1961年首次从霉变花生粉中被发现的一类霉菌毒素[1]，由曲霉属中的黄曲霉菌（A．flavus）和寄生曲霉菌（A．parasiticus）所产生[2]。
根据其分子结构与感染方式的不同，天然产生的黄曲霉毒素分为B1，B2，G1，G2，后来人们又在奶中分离到黄曲霉毒素的另外两种衍生物，即M1和M2[3,4]。
除此之外，人们还分离到了多种黄曲霉毒素的代谢产物、异构物和类似物，如P1、Q1、B2a、G2a等。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标通过评估PCV2的感染和增殖状况、PK15细胞的氧化还原状态等指标，探究AFB1对感染于PK15细胞上的PCV2的影响，探讨其可能的机理。
研究内容评估AFB1对PK15细胞的安全浓度；检测AFB1对PCV2感染和复制的影响；检测AFB1对感染了PCV2的PK15细胞的氧化还原状态的影响。
拟解决的关键问题运用荧光定量PCR和细胞免疫荧光技术来评估PCV2复制状况，分析AFB1对PCV2复制的影响，并通过检测PK15细胞的氧化还原状态探讨可能的机制。
3. 研究的方法与方案
1. 细胞培养和病毒接种无PCV1污染的PK15细胞培养于含有1% 10000IU/ml青霉素和10000μg/ml链霉素、4%小牛血清的DMEM培养基中，培养温度为37C，二氧化碳浓度为5%。
传代时用适当消化液（0.25%胰蛋白酶液）进行消化，吹打制悬，然后分装稀释，继续培养。
PCV2毒液接种于培养的PK15细胞，12h后弃去病毒液，经D-Hanks液洗后，加入DMEM培养基继续培养72h，反复冻融法收毒。
4. 研究创新点
本课题旨在研究黄曲霉毒素B1对2型猪圆环病毒在细胞上感染和增殖能力的影响，并试图对其机理进行探讨。
国内外尚未出现相关的文献报道，这是本课题创新所在。
5. 研究计划与进展
2月底3月底：学习PK15细胞培养、传代和病毒接种、收毒等技术4月初4月中旬：评估AFB1对PK15细胞的安全浓度4月中旬5月中旬：荧光定量PCR和细胞免疫荧光技术来评估PCV2在细胞内感染和增殖状况5月中旬5月底：检测AFB1对感染了PCV2的PK15细胞的氧化损伤5月底：整理数据，撰写研究论文
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