1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.本课题的意义猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起猪的一种急性、热性、高度接触性和致死性的传染病,其主要特征是发病急、稽留热、全身泛发性点状出血和脾梗死,给养猪业造成重大损失[1]。
猪瘟兔化弱毒株是用猪瘟强毒经家兔传代减毒, 经继代纯化成功培育出一株能适应家兔的猪瘟病毒变异毒。
该毒株对猪无致病性、遗传性能稳定、具有良好的免疫原性[2]。
2. 研究的基本内容和问题
4.研究的目标本试验通过单因素调配基础方中不同物质(EDTA、L-谷氨酸钠、BSA、NZA)的质量分数,从而初步筛选出猪瘟兔化弱毒疫苗耐热冻干保护剂优化配方。
使其在较高温度下能较长时间保存,并能保证疫苗效价,为动物耐热活疫苗的制备提供技术支持,以解决疫苗长久以来依赖冷链运输、储存不便以及高成本等问题。
5.研究内容5.1 耐热保护剂的单因素筛选。
3. 研究的方法与方案
7.研究方法本研究采用比较对照试验,对保护剂配方进行多次筛选,并与活疫苗进行融合后冻干,在4℃、37℃温度条件下保存处理之后,进行疫苗效价和兔体反应量(RID)的测定,从中选出能在2-8℃保存12-24个月保存的配方。
8.技术路线9.试验方案(1)本实验使用的猪瘟兔化弱毒疫苗由南京天邦生物科技有限公司提供(2) 耐热保护剂配制:保护剂配制分二部分:保护剂成分A(能高温灭菌的部分)采用110℃20min灭菌方法,保护剂成分B(不能高温灭菌的部分)采用0.22微米过滤器进行过滤。
使用时二者按比例混合后,配制疫苗。
4. 研究创新点
12、特色或创新之处经耐热保护剂冻干后的猪瘟兔化弱毒疫苗能在2-8℃保存12-24个月,能够降低疫苗储存及运输成本,这对于我国兽用疫苗耐热性能的提高、制备工艺的改进具有重大意义。
5. 研究计划与进展
11.研究计划及预期进展(1) 2014.2.24‐2014.3.15 完成保护剂配方的配制(2) 3.15‐3.31 保护剂的处理(3) 4.01‐4.15 完成病毒和保护剂的混合,并进行分装、冻干。
(4) 4.15‐4.30 完成对活疫苗的储藏,并对样品进行挑选,准备测定。
(5) 5.01‐5.12 对筛选的样品进行效价和RID的测定。
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