均一性黄芪中性多糖的提取纯化及硒化修饰的研究开题报告

 2023-02-12 12:29:28

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等(列出主要参考文献)1 黄芪多糖的组成黄芪(Radix Astragalus)是豆科植物蒙古黄芪或夹膜黄芪的干燥根, 主要化学成分为多糖、皂甙、黄酮、多种氨基酸及微量元素[1]。

其性甘,微温,归脾、肺经,具有补气升阳、益卫固表、利水消肿、托疮生肌之功效,可煎服、生用或蜜炙用[2]。

黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)为主要的有效成分,包括葡聚糖和杂多糖[3]。

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2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容和拟解决的关键问题1 研究目标1.1 黄芪中提取分离黄芪中性多糖并进行分离纯化;1.2 对黄芪中性多糖进行硒化修饰,研究黄芪多糖硒化修饰的方法和最佳工艺。

2 研究内容本实验采用水提醇沉法提取中性粗多糖,三氯乙酸法及DEAE柱层析法制备均一性多糖,然后采用硝酸-亚硒酸钠法进行正交实验,对硒化条件进行优化,为进一步深入研究多糖的硒化修饰提供基础。

3 拟解决的关键问题3.1 黄芪多糖在提取中会损失很多多糖,得到的一般为最初黄芪质量的五分之一,本实验将采取多种方法,旨在能提高黄芪多糖的得率。

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3. 研究的方法与方案

研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析1 黄芪多糖的提取水煎醇沉法取黄芪饮片1kg在55℃鼓风干燥箱中干燥12h后粉碎,用2000mL(以刚好淹没黄芪饮片碎粒为宜)95%乙醇浸泡12h,然后加入95%乙醇6L,水浴80℃回流2次,每次1h,至回流液接近无色,药渣晾干,加入20倍水煎煮2次,每次30min,合并滤液,浓缩至1000mL, 2500rpm离心20min弃去沉淀,缓慢加入95%乙醇,边加边搅拌,使醇含量达到80%,4℃静置12h,回收乙醇,离心取沉淀,60℃真空干燥,得到粗黄芪多糖,称重并计算提取率。

2 黄芪多糖的纯化三氯乙酸法除蛋白:将黄芪多糖溶解于10倍蒸馏水中,60℃水浴加热使其溶解完全。

配0.5%的糖液,加入其体积3%的浓度为10%的三氯乙酸液,振摇,然后冰箱放至24小时,即可。

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4. 研究创新点

特色或创新之处将采取多种方法提取黄芪中的多糖,旨在能提高黄芪多糖的含量及质量。

黄芪多糖在硒化过程中,反应时间、反应温度、反应物比例等因素均影响硒化多糖的含量,拟通过正交方法进行条件优化。

这些都将有助于黄芪多糖发挥更好更广泛的药理作用并产生更好的临床效果。

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5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展本实验工作量大小适中,难度一般,时间初步定为2014.2.25~2014.5.252014年2月 资料查阅,与导师讨论实验的可行性2014年3月 黄芪多糖提取分离并纯化,申报课题及撰写开题报告; 2014年4月 继续黄芪多糖的分离纯化,并进行硒化修饰;2014年5月 硒化黄芪多糖的含量测定,找出最优修饰条件,并撰写论文准备毕业答辩。

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