旋毛虫膜相关孕酮受体组件2的基因克隆与表达开题报告

 2023-02-15 10:15:10

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

一、课题意义

旋毛虫(Trichinella spiralis)是线虫纲,毛形科,毛形属的一种线虫。由于在其发育繁殖过程中经历一个细胞内寄生阶段,旋毛虫被认为是最大的细胞内寄生虫之一[1]。旋毛虫病是由旋毛虫引起的一种人兽共患食源性寄生虫病,人或动物通过生食或半生食感染旋毛虫的肉类食物而染病。旋毛虫可在宿主体内长期寄生,被感染者常终生带虫[2]。据世界旋毛虫委员会统计,全世界大约有1000多万人感染旋毛虫病。人感染旋毛虫后,可以导致各种临床症状,可以呈温和的流感症状,也可诱发严重性炎症,甚至造成死亡[3]。鉴于旋毛虫病的危害,目前世界各国均把屠宰动物的旋毛虫病检验作为强制性必检项目,以此来切断其由动物向人的传播。

孕酮是一种很重要的甾体激素,在不同生理阶段,孕酮所起的作用也有所不同。随着生物技术和生殖内分泌学的发展,孕酮在动物生殖活动中的重要性越来越被人们所认识。孕酮发挥生理作用是通过其受体即孕酮受体(pro gesterone receptor ,PGR)介导的,机体内孕酮的最终效应不仅取决于孕酮本身的分泌与代谢,还与孕酮受体基因的表达与功能密切相关。因此,研究动物孕酮受体及基因对研究动物的生殖生理具有重要意义。

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2. 研究的基本内容和问题

一、研究目标

孕酮受体基因的克隆及其表达。

将目的基因插入到表达载体pET-32a 构建重组表达质粒,进行原核表达;

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3. 研究的方法与方案

一、研究方法

1、文献研究法:搜集整理相关研究资料,为研究做准备。

2、实验法:PCR扩增法,鉴定法,蛋白表达法等。

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4. 研究创新点

旋毛虫具有重新调整机体免疫细胞功能的作用,充当着宿主免疫反应调节者的角色,其作用不仅针对旋毛虫抗原,对第三方抗原也有效。这一观点在旋毛虫抗肿瘤以及改善自身免疫性疾病(如炎症性肠病、自身免疫性糖尿病和多发性脑脊髓硬化症等)的研究中得到证实。因此,深入研究旋毛虫调节宿主免疫平衡的机制不仅能有效地预防和治疗旋毛虫病,同时能为治疗肿瘤以及自身免疫性疾病提供一种新的方法和途径。

目前旋毛虫孕酮受体相关研究比较少,其在旋毛虫的繁殖过程以及与宿主间的相互作用中是否存在影响尚不可知。如果孕酮受体在旋毛虫成虫繁殖过程中有关键作用的话,我们是否可以制作相关疫苗,这是值得研究的。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展

2016年9月7号-9月25日

选课题,收集有关资料,熟悉实验室环境和进行预试验,准备实验有关的材料。

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