1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
细胞穿刺是通过细针抽吸获得组织细胞样本的一项病理诊断技术。细针穿刺细胞病理学是对细针穿刺获取的样本进行细胞形态学及相关指标分析从而达到诊断的目的[1]。细针穿刺在临床上的最早应用可以追溯到19世纪40年代,医生用针吸的方法取得了脑部肿块样品[2]。目前细针穿刺主要用于肿瘤的诊断以及肿瘤预后相关指标的检测,所得的样品还可以用于分子病理学的检测,为临床治疗提供指导[3,4]。
细针穿刺主要用于浅表及深部组织肿块性质的鉴别判断,是肿瘤还是肺肿瘤性质。大多数情况下细针穿刺技术还能对肿瘤的良恶性及肿瘤的类型进行判断。此外细针穿刺还有助于对恶性肿瘤进行分级和分期。细针穿刺的优点在于标本处理时间短,可立即评估;一般无需麻醉,并发生少;诊断具有较高的敏感性和特异性;不干扰后续影像诊断和治疗[5]。深部的肿块如怀疑是血管性病变,由于无法有效的控制出血不宜穿刺。细针穿刺比较安全,并发症不多见且不严重,其中最常见的是疼痛、出血[6]。对于浅表的肿块来说,即使有出血只要局部加压即可止血。对于深部组织来说,出血可能会有一定危险性。对于有凝血功能障碍的动物来说要慎用细针穿刺。穿刺造成的感染也很少见,但操作时仍要注意消毒。穿刺部位肿块一般只要对穿刺部位用70酒精进行消毒即可。经皮深部组织穿刺应按照小手术的要求碘酊与酒精消毒,并进行创巾隔离。
细针穿刺所用设备简单,一般采用5-10 mL注射器和23-27 G,长约3-5 cm的针头,针头刺入组织进行抽吸或者直接用针头反复刺入组织采用。采样后制备细胞涂片,固定后后染色。一般采用Diff-Quick染色,吉姆萨染色,瑞士染色或HE染色[7]。最后对细胞形态学进行分析。细胞形态学分析是细针穿刺的重要一环,对所获的细胞的量、质及背景信息进行观察,结合临床信息对病变做出判断。首先判断细胞的数量是否满足解释患者的肿块的性质。然后判断细胞的类型及结构特征,上皮起源,间质起源,血液起源的细胞形态,分布,密度等均存在差异。还要判断细胞的大小和异形性,细胞质的特征,细胞核的特征。这些对于判断肿瘤的恶性程度有重要的意义。一般来说细胞学恶性肿瘤表现为细胞不对称有丝分裂;多核细胞;染色质异常分布;细胞大小不等;形态多样;细胞核大小不等;核仁大小形态不一;核质比改变[7]。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标
建立犬常见肿瘤细针穿刺细胞病理学诊断方法。
研究内容
3. 研究的方法与方案
研究方案和方法
1. 研究犬常见肿瘤细胞穿刺方法
对同一样品采用两种穿刺技术,一种是无负压细针穿刺,采用23-27 G针头插入肿块组织反复2-3次,然后涂片;另外一种是有负压抽吸细针穿刺,用23-27 G针头链接5-10 mL注射器,插入组织中进行抽吸,然后涂片。
4. 研究创新点
小动物临床肿瘤病例越来越多,采用细针穿刺技术对肿块的性质进行诊断具有标本处理时间短,可立即评估;一般无需麻醉,并发生少;诊断具有较高的敏感性和特异性;不干扰后续影像诊断和治疗等优点。
本课题比较不同肿瘤的细针穿刺方法,染色方法。
观察不同肿瘤的形态结构特征,以期建立犬临床常见肿瘤的诊断程序。
5. 研究计划与进展
2016/9-2016/10 熟悉细针穿刺取样方法,细胞涂片方法,细胞染色方法
2016/11-2016/12 临床样品收集,细针穿刺细胞病理学诊断
2017/1-2017/4 材料整理,撰写毕业论文
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