1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1.本课题的意义卵母细胞的发育依赖于卵泡液中的各种激素和生长因子，以及这些物质在卵母细胞和颗粒细胞之间的相互影响。
探讨两个不同大小的卵泡，既成熟卵泡与非成熟卵泡的卵泡液内各生长因子与激素水平的关系的不同之处，以及影响颗粒细胞质量的因素与卵泡的发育及胚胎的质量的关系有何差异等等。
通过对比实验和分析，可以预估卵母细胞体外成熟是受IVM中卵泡液质量的影响，还是受卵母细胞质量的影响。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标与研究内容研究的目标及内容包括成熟大卵泡与非成熟小卵泡成熟前后各项卵巢生殖特性的具体差异情况，重点对成熟卵泡与非成熟卵泡内卵母细胞体外培养的差异进行对比分析。
做出综合的分析和对比，既对不同发育阶段卵泡内卵母细胞在不同IVM中体外成熟培养过程卵母细胞体外培养的活率、极体率，孤雌激活和化学激活后的发育能力，既二细胞率、四细胞率、囊胚率，以及对卵母细胞胞质内线粒体和脂滴分布、数量等情况做出多角度分综合分析。
探讨两个不同阶段的卵泡，既成熟卵泡与非成熟卵泡的卵泡液内各生长因子与激素水平的关系的不同之处，以及影响颗粒细胞质量的因素与卵泡的发育及胚胎的质量的关系有何差异等等。
3. 研究的方法与方案
本课题初步实验研究方法及方案如下所示。
1、卵母细胞体外成熟液(IVM)的配制从新鲜卵巢上抽取成熟卵泡（3-6mm）卵泡液配制IVM；从未成熟卵泡（小于3mm）内抽取卵泡液配制IVM(未成熟卵泡液)，用于实验培养卵母细胞至MⅡ期。
2、分组培养卵母细胞将从成熟卵泡内采得的卵母细胞分别置于IVM(成熟卵泡液)和IVM(未成熟卵泡液)中，作为对照组培养42小时；另外，将从未成熟卵泡液中采得的卵母细胞分别置于IVM(成熟卵泡液)和IVM(未成熟卵泡液)中，作为实验组培养42小时。
4. 研究创新点
母猪卵巢卵母细胞体外成熟、体外受精虽然已取得重大进展，但目前建立的培养体系运用在畜牧生产上的效率不高，本实验在初步实验计划基础上结合以有的研究结果，在初步实验方案开展顺利并实验条件允许的情况下，对不同发育阶段卵泡内卵母细胞在不同IVM中体外成熟培养过程卵母细胞体外培养的活率、极体率，孤雌激活和化学激活后的发育能力，既二细胞率、四细胞率、囊胚率，以及对卵母细胞胞质内线粒体和脂滴分布、数量等情况做出多角度分综合分析，探究卵巢因素对卵母细胞体外成熟的影响，从而对已有的母猪卵母细胞体外培养体系做进一步研究。
任何一种已有的体外培养体系都具有一定的局限性。
在实验条件和实验时间充裕情况下，重点关注母猪卵母细胞不同成熟阶段对体外生长发育体系有不同需求的特点，对不同阶段的卵泡液以及体外成熟液内的各种因子和激素做进一步有效研究，优化并完善能够适应不同质量或不同发育阶段的卵母细胞体外成熟的各种培养体系。
5. 研究计划与进展
通过上述实验设计（表一、表二所示），计划每组实验重复4次，每次采样用20个卵巢。
一周两次采样，预计两周内完成。
两周以后分析实验统计结果，并根据实验结果差异是否显著，预估卵母细胞体外成熟是受IVM中卵泡液质量的影响，还是受卵母细胞质量的影响。
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