1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
意义:本实验通过大鼠灌胃精氨酸,探究精氨酸对钙敏感受体的表达以及胃肠激素分泌的影响规律。
国内外研究概括:日粮中的蛋白质和氨基酸不仅是动物重要的蛋白质来源,而且是重要的信号分子,调控胃肠道的多种生理过程,包括肠神经系统的兴奋性、肠上皮细胞的增殖分化、肠液及胃肠激素的分泌,从而影响胃肠蠕动、营养素的消化和吸收等生理功能。
它们可激活胃肠道内分泌细胞中表达的钙离子敏感受体(Calcium sensing receptor, CaSR),进而促进胃肠激素的产生和释放。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标、内容和拟解决的关键问题:研究目标:本实验主要探讨精氨酸是否可以促进大鼠胃肠激素的分泌以及精氨酸对大鼠十二指肠,空肠,回肠CaSR表达的影响进而探究CaSR在精氨酸调控胃肠激素分泌中的作用。
研究内容:本试验随机选择32只雄性大鼠,先让大鼠适应环境一周,接着按照体重平均分为两组,对两组大鼠分别灌胃20mM/L的精氨酸或生理盐水(对照),再过一周,将大鼠处死,检测大鼠胃肠激素的分泌情况以及胃肠道(十二指肠,空肠,回肠)钙敏感受体的表达。
解决的关键问题:探究精氨酸对大鼠胃肠激素分泌的影响以及精氨酸对大鼠胃肠激素、十二指肠、空肠,回肠CaSR表达的影响的分泌。
3. 研究的方法与方案
实验方案:32只大鼠先适应环境一周,一周过后,按照体重相近原则随机分为2个组再灌胃一周,一组连续灌胃L-ArgHCl溶液(20 mmol/kg-1),另一组则连续灌胃相同体积的生理盐水(对照组)。
连续灌胃一周的实验后就进行眼球静脉采血,血液凝固后以3500g离心10分钟取上层血清,-20C冷冻保存,用于胃肠激素CCK、GLP-1的检测。
采血后脊椎脱臼处死,立即打开腹腔取出胃肠道,根据解剖学区分部分组织, 冰上剪取、十二指肠、空肠及回肠中段组织,测定小肠各部位组织中CaSR的表达。
4. 研究创新点
特色或创新之处:本试验探究了表达于胃肠道中的氨基酸感应体CaSR与精氨酸调控胃肠激素分泌之间的关系。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展:研究计划:计划可以通过本实验中大鼠灌胃精氨酸来探究精氨酸对钙敏感受体的表达以及胃肠激素分泌的影响规律。
预期:探讨出胃肠道内分泌细胞中表达的CaSR是否与精氨酸调节胃肠激素的分泌有关,进而为精氨酸调控动物的采食等方面奠定基础。
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