中华绒螯蟹羧酸酯酶基因的表达及其对农药耐受性的研究开题报告

 2023-02-16 09:19:27

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

1.课题意义:中华绒螯蟹又名大杂蟹、河蟹,隶属于节肢动物门,甲壳纲、绒螯蟹属,河蟹适应性强,主要分布于我国沿海省各大水系,由此形成长江水系、辽河水系、瓯江水系和闽江水系。

河蟹是洄游性甲壳类动物,经济价值较高,河蟹肉质细嫩,蟹黄蟹膏不仅美味可口而且营养丰富,是人们的珍馐美食,也是世界各国水产增养殖的重要对象。

近来,河蟹市场需求量日益增多,养殖规模不断扩大。

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2. 研究的基本内容和问题

1.羧酸酯酶基因的克隆及分析根据实验室完成的中华绒螯蟹高通量测序获得的CXEs基因片段,分别设计5′和 3′RACE 引物,以河蟹肝胰腺组织为模板进行CDNA未端快速扩增。

将产物分离纯化后转化培养,得到基因全长序列。

利用NCBI在线工具和SMART等软件对全长序列进行分析,得到基因开放阅读框,信号肽等特定的序列特征。

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3. 研究的方法与方案

实验设计:1、养殖实验1.1、养殖蟹种实验蟹种是从江苏盐城养殖场带回来的河蟹,将其随机分别放养在四个养殖缸内,养殖缸模拟池塘生态系统,每个缸内放养30只螃蟹。

在实验前先在养殖缸内喂养1个月,以适应养殖缸的环境。

在养殖缸中放养过量的螃蟹,以确保实验时材料的充足。

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4. 研究创新点

综合分析河蟹CXEs对农药作用的应激反应,明确CXEs对农药的解毒代谢机理,为合成相应抗体奠定基础

5. 研究计划与进展

(1)2017.08-2017.09查阅资料,拟订试验方案。

(2)2017.09-2017.11进行CXEs基因的克隆分析(3)2017.11-2018.02进行CXEs原核表达及Westen Blost 鉴定(4)2018.02-2018.03进行CXEs基因的组织表达实验,并整理分析数据。

(5)2018.03-2018.04进行三种农药处理后CXEs基因的应激表达,并整理分析。

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