1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本课题的意义:蛋鸡的开产日龄、平均蛋重、产蛋量等产蛋性状是很重要的经济性状,是在培育优秀蛋鸡种时重点考虑的部分,在这些性状种,开产日龄是高遗传力性状;产蛋性状是由许多基因共同控制的复杂性状,受到多基因效应影响,研究表明许多基因都与产蛋性状有密切联系,如神经肽Y基因【1】、催乳素(PRL)基因【2,3】,血管活性肠肽等。
多巴胺是这一性状种的重要因子,而多巴胺手提2(DRD2)是其中重要的一种,有研究表明鸟类DA通过使DRD2抑制垂体中血管活性肠肽(VIP)和PRL的分泌来调控鸟类的繁殖性状。
研究DRD2J基因调控区上某些位点突变对于鸡性早熟的影响,其结果可以用于种鸡的选择和培育,充分利用蛋鸡的生产性状。
2. 研究的基本内容和问题
目标:分析生产数据和基因是否突变的关系,找出DRD2基因对鸡性早熟的影响,并根据结果找出提高蛋鸡的产蛋性能的方法。
内容:研究DRD2基因调控区上某些位点的突变对于鸡性早熟的影响。
拟解决的关键问题:如何选择合适的样本,样本量是否足够证明实验结果;会不会存在其他因素导致性早熟。
3. 研究的方法与方案
研究方法和技术路线:论文通过收集几百只东台黄鸡的开产日龄,产蛋量等数据,结合样品DRD2位点是否基因突变的检测。
根据自身的经验,查阅前人的研究成果,进行数据分析。
实验方案:血液DNA提取:(1)将保存于-20℃的鸡血样取出、常温化冻,12000rp离心30sec,备用;(2)取200uL上述血样于1.5mL离心管中,加入20uLProteinnaseK混匀;(3)加入200uL缓冲液GB,震荡充分混匀,70℃放置10min(期间多次拿出颠倒震荡以加速反应),溶液变清亮,12000rp简短离心;(4)加入200uL无水乙醇,充分震荡混匀20sec,12000rp简短离心;(5)将上述溶液全部加入吸附柱CB3中(吸附柱置于收集管中),12000rp离心30sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中;(6)向吸附柱CB3中加入400uL按比例掺入无水乙醇的缓冲液GD,12000rp离心30sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中;(7)向吸附柱CB3中加入500uL按比例掺入无水乙醇的漂洗液PW,12000rp离心30sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中;(8)重复上一步骤;(9)将吸附柱CB3转入干净的离心管中,向吸附膜正中间部位悬空滴加150uL洗脱缓冲液TE,室温放置3min,12000rp离心3min,将溶液(即所得的DNA溶液)收集到离心管中,放置于20℃冰箱保存备用。
4. 研究创新点
本项目研究充分发掘利用地方种鸡资源,培育出肉质性状和生产性能俱佳的优质品种。
本项目将采用分子遗传检测与分析技术与传统的育种方法结合。
5. 研究计划与进展
本课题研究的周期初步定为2个月,分三个阶段进行。
准备阶段:明确实验目标,查阅相关文献,制定实验方法,准备样品和实验所需试剂药品等。
实验阶段:根据制定好的实验方法对准备好的样品进行检测,记录下数据并与样品的观察数据相对应,用以之后的数据分析。
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