1. 研究目的与意义
本实验主要研究蟾酥的抗肿瘤活性，主要通过对编号为7721的肝癌细胞进行培养，然后考察不同产地的浓度为0.6μg/ml的蟾酥甾烯提取液对肿瘤细胞的抑制率。
目前治疗肿瘤疾病的难点在于肿瘤细胞会产生多药耐药性，而蟾酥的抗肿瘤机制中有一个机制就是其具有逆转肿瘤多药耐药，所以我们可以通过对蟾酥的抗肿瘤活性的研究来进一步提纯分离蟾酥，减少其毒性作用，从而进一步治疗肿瘤。
2. 文献综述
蟾酥综述摘要：蟾酥作为一种重要的传统中药，其化学成分复杂，临床用途较广。
随着国内外对蟾酥越来越深入的研究，其化学成分的药理活性机制也日益清晰，主要被用于抗肿瘤、强心、抗菌、镇痛等方面，甚至用于局部麻醉，且治疗效果显著。
对蟾酥的化学成分、药理作用等方面进行综述，为蟾酥的临床安全合理应用提供参考。
3. 设计方案和技术路线
1.细胞复苏取一个中等大小烧杯放入适量的超纯水，然后将烧杯放入水浴锅中，保持水浴锅的温度为37，从-80冰箱中取出编号为7721的肿瘤细胞，迅速放入烧杯中轻轻振摇，使细胞在1-2分钟内迅速解冻，解冻完成后将其转移到超净台。
将细胞液吸取到5ml Ep管中，1000rpm,5分钟进行离心，离心完毕后，弃去上清液，然后加入3ml全培，吹打均匀，约35-50次，最后将其吸取到细胞培养瓶中，放入37孵箱培育。
2.细胞传代当细胞长满约90%时，取出细胞培养瓶，弃去废液，用3ml的PBS清洗3次，随后加入1ml的胰酶，将其放在倒置显微镜下观察，约1-2分钟，细胞变圆，加入3ml的全培停止消化。
4. 工作计划
2022.1.3-2022.1.22 查找文献2022.2.12-2022.2.24 培养肿瘤细胞2022.2.25-2022.3.6 种板、加药，进行MTT实验2022.3.12-2022.5.30整理数据，撰写论文
5. 难点与创新点
收集了不同产地不同批次的商品蟾酥，首次提出以8个甾烯类成分作为质控指标，对不同批次蟾酥样品的质量进行了评价，为蟾酥商品的质量控制提供参考依据。
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