1. 研究目的与意义
毕业论文的内容：1.关于KGF-2的文献研究
2.对于KGF-2的了解
3.对摇瓶工艺的系统性阐述，控制单变量，研究温度、PH、诱导温度、诱导时间、培养基的种类对摇瓶的影响
2. 文献综述
重组人角质细胞生长因子-2的应用
卞 鹏
摘 要：目的：了解人角质细胞生长因子-2（KGF-2)的来源，分布与应用。总结其菌种筛选与摇瓶工艺的优化。方法：对近年来国内外有关人角质细胞生长因子-2的文献进行归纳总结，并对其菌种筛选和摇瓶工艺进行研究。
3. 设计方案和技术路线
研究方案：1.菌种筛选：LB固体培养基灭菌冷却至50-60度后，加入Kana至终浓度50ug/ml摇匀后倒平板。取交接来的菌种划线，恒温箱37℃培养16~24h。从平板中挑选生长菌落较大形态良好的单菌落8个。将上述挑选好的8个单菌落。编号好后分别挑出接种于加入Kana至终浓度50ug/ml的LB液体培养基（5ml/50ml离心管）中，37℃，200rpm过夜培养。LB液体培养基种子培养OD600达到0.8~1.0后，加入IPTG至浓度为1mM诱导表达，3h后取样并离心，送检SDS-PAGE。
2.摇瓶工艺：CNTF菌接种于一定的培养基中，过夜培养，接种于培养基中，培养至一定的OD值时，IPTG诱导，诱导一定时间后结束培养，离心后取沉淀，沉淀送检电泳分析目的蛋白纯度来确定最佳培养基、温度、PH、诱导时间、诱导浓度。
技术路线：1.菌种筛选：培养基配制分装及灭菌→平板琼脂培养基划线培养→一级种子培养基接种培养→培养基接种培养→诱导表达选取表达最好的菌种
4. 工作计划
2022.01～2022.03确定课题，文献资料整理，撰写开题报告
2022.03～2022.05确定实验方案，进行实验研究
2022.05～2022.06撰写毕业论文，准备答辩
5. 难点与创新点
角质形成细胞生长因子-2（KGF-2)是由间质细胞分泌的，通过旁分泌途径刺激上皮增殖的细胞因子。
研究表明KGF在组织修复过程中发挥着很重要的作用，这些作用主要是KGF通过加强上皮屏障功能完成，包括促进细胞的增殖、迁移、分化、存活等。
而关于KGF-2的发酵研究较少，本论文主要针对于KGF-2的菌种筛选和摇瓶工艺优化的研究对其发酵工艺提供实验性的数据。
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