1. 研究目的与意义
内容： 1.大肠杆菌表达重组sRANKL（可溶性核因子κB受体活化因子配体）的发酵过程2.影响大肠杆菌可溶性表达的因素 3.研究大肠杆菌在不同的条件下表达重组sRANKL的产率，并对其进行优化，找到最优工艺意义：大肠杆菌一直是表达外源蛋白的首选表达系统。
但由于外源蛋白在表达过程中容易被宿主细胞蛋白酶降解或者形成包涵体，其应用受到了限制，我们要找到大肠杆菌表达外源蛋白的最优工艺，使包涵体变少，可溶表达增多，便于后续纯化工作。
2. 文献综述
大肠杆菌表达重组sRANKL发酵工艺的优化文献综述摘 要：大肠杆菌一直是表达外源蛋白的首选表达系统。
但由于外源蛋白在表达过程中容易被宿主细胞蛋白酶降解或者形成包涵体，其应用受到了限制。
本文综述了在大肠杆菌中表达重组sRANKL的影响因素和研究进展，以期提高具有生物活性的外源基因的表达水平。
3. 设计方案和技术路线
通过研究不同的发酵条件来比较sRANKL的表达情况，主要以下几个方面：1、不同的发酵培养基；2、不同的诱导pH；、3、不同的诱导剂浓度；4、不同的诱导温度的影响5、不同的诱导时间等。
4. 工作计划
第一阶段：2022年3月上旬：文献综述思路形成，实验方案制定；第二阶段：2022年3月下旬：初步试验、实验条件选择；第三阶段：2022年4月至5月：进行实验研究；第四阶段：2022年5月至6月：整理数据，撰写论文
5. 难点与创新点
大肠杆菌一直是表达外源蛋白的首选表达系统。
但由于外源蛋白在表达过程中容易被宿主细胞蛋白酶降解或者形成包涵体，其应用受到了限制。
包涵体形成是比较复杂的，与胞质内蛋白质生成速率有关，新生成的多肽浓度较高，无充足的时间进行折叠，从而形成非结晶、无定形的蛋白质的聚集体包涵体内的蛋白是非折叠状态的聚集体，不具有生物学活性，同时也为蛋白纯化等下游工作带来很大的麻烦。
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