程序性死亡受体(PD-1)在真核细胞中的表达和纯化开题报告

 2022-12-27 11:28:43

1. 研究目的与意义

近年来,PD-1/PD-L1 信号通路因参与肿瘤免疫逃逸而成为研究热点,PD-1是免疫球蛋白B7CD28家族成员之一,主要在免疫细胞(活化的CD4 T细胞、CD8 T细胞、B细胞、自然杀伤T细胞、单核细胞和树突状细胞)中表达。

程序性死亡受体(PD)-1/PD-L1 信号通路作为 T 细胞免疫反应的协同刺激信号通路,在适应性免疫中发挥着重要的作用。

肿瘤的免疫治疗是目前研究的主要热点之一。

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2. 文献综述

文献综述程序性死亡受体-1(PD-1)信号通路在肿瘤治疗中的研究进展摘 要:程序性死亡受体-1( PD-1) 是一种主要存在于T 细胞上的抑制性受体,可与配体 PD-L1、PD-L2 相互作用,抑制 T 细胞增殖、活化和细胞因子的分泌。

通过肿瘤发生时肿瘤细胞表面 PD-1 配体的表达异常增加,介导了肿瘤的免疫逃逸的现象。

发现抑制 PD-1 信号通路有助于 T 细胞的抗肿瘤效应,该通路抑制剂的开发也成为肿瘤免疫治疗的一个新热点。

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3. 设计方案和技术路线

研究方案:1.质粒的构建(设计引物-PCR扩增)2. PD-1抗体的表达和鉴定3. PD-1抗体的纯化4. PD-1抗体的检测技术路线:培养细胞→细胞转染、表达→收集细胞上清→蛋白纯化→跑SDS聚丙烯胺凝胶电泳鉴定蛋白→HPLC高效液相鉴定蛋白纯度。

4. 工作计划

2022年1~2月查阅PD-1/PD-L1的相关文献,明确PD-1/PD-L1在肿瘤治疗的研究现状。

201 8年2月 根据文献提示和指导老师的指导,完成实验路线的设计。

2022年3~6月根据实验路线完成实验。

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5. 难点与创新点

依靠机体自身的免疫能力实现对肿瘤细胞的杀伤

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