1. 研究目的与意义
内容中药山茱萸为山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis Sieb.et Zucc.的干燥成熟果肉,酸、涩,微温。
归肝、肾经。
具有补益肝肾,收涩固脱的功效。
2. 文献综述
巨噬细胞研究进展摘要 糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)是多种因素综合作用的结果,其与肾组织炎性反应,尤其是巨噬细胞的活化密切相关。
巨噬细胞在固有免疫和适应性免疫反应中具有重要的作用,它可将加工后的抗原提呈给相应的T细胞,活化后的T细胞通过细胞膜上的分子或分泌的细胞介素进一步活化巨噬细胞。
此时的巨噬细胞吞噬杀伤能力大大加强,并释放各种活性物质,因此巨噬细胞是主要的炎性反应调节细胞。
3. 设计方案和技术路线
研究方案1、山茱萸有效成分及AGEs的获取 山茱萸烯醚萜苷类有效成分:于成都瑞芬思生物科技有限公司购买。
AGEs制备:将牛血清白蛋白BSA(Bull Serum Albumin)在0.2mol/L磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline,PBS,pH7.4)中配成50mg/ml,同时将葡萄糖在上述液体中配置成0.5mol/L,充分溶解后,37℃避光孵育3个月,使其形成AGEs-BSA。
同时平行条件下配置不加入葡萄糖的上述牛血清白蛋白溶液,以制备无糖基化BSA(0-BSA)作为对照。
4. 工作计划
(1)2022年1月-2月确定课题,查阅相关资料(2)2022年2月-3月查阅文献,写综述,撰写开题报告制备AGEs,建立细胞损伤模型,筛选出所需AGEs最佳刺激浓度与时间(3)2022年3月-4月药物处理,检测炎症相关因子,极化相关蛋白的表达,检测信号通路相关蛋白(4)2022年4月-5月处理与分析数据开始写毕业论文,形成论文初稿(5)2022年5月-6月毕业论文修改,定稿,提交论文,准备答辩
5. 难点与创新点
生地、山茱萸在防治DN中有很好的中医临床依据,现代药理学研究也证实山茱萸对糖尿病发生发展的多个环节具有干预作用。
研究表明,山茱萸总苷配伍多糖为防治糖尿病肾病的最佳活性部位群,山茱萸各有效部位合理组合后,均能延缓小鼠肾病变的进程及降低肾病变的严重程度。
本项目设计在良好的前期实验研究与深入的文献分析基础上,以AGEs致巨噬细胞炎症损伤模型为研究对象,研究山茱萸环烯醚萜苷类单体成分干预AGEs致巨噬细胞炎症损伤的分子机制,阐明山茱萸滋阴清热治法治疗DN的现代物质基础,本项目所提出的研究思路具有良好的前期实验与文献依据支撑,研究思路及技术方案设计符合中医药理论思想,具有良好的创新性和可行性。
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