1. 研究目的与意义
目的:探讨桔梗多糖对H2O2诱导的PC12细胞氧化应激损伤的保护作用方法:通过MTT比色法检测桔梗多糖对PC12细胞增殖的影响;采用 H2O2损伤 PC12细胞建立氧化应激损伤模型,通过 MTT 法检测细胞活力;采用紫外分光光度法测定LDH漏出量,观察损伤细胞的损伤程度;测定桔梗多糖对H2O2诱导的PC12细胞中活性氧(ROS)水平、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px) 活力的影响以及对丙二醛(MDA) 含量的影响。
意义:前期研究发现,桔梗多糖的抗氧化活性可能是桔梗降血糖作用的机制之一。
氧化应激与高血糖症密切相关。
2. 文献综述
桔梗抗糖尿病脑病的药理作用研究进展郑依依,李海涛* (南京中医药大学药学院,江苏 南京 210046)摘要 糖尿病脑病作为糖尿病并发症之一,以获得性认知和行为缺陷为特征,伴随着痴呆的发生。
桔梗作为一种药食两用的植物具有众多开发价值。
本文对桔梗抗糖尿病脑病的药理作用,包括降血糖、降血脂、抗氧化应激、抗肥胖、抗炎、血管保护作用等进行综述,可为中药桔梗及其复方治疗糖尿病脑病的药品及保健品的开发提供理论基础。
3. 设计方案和技术路线
1. 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)细胞的培养2. 考察100 ~1000mgL-1的桔梗多糖对细胞活力的影响,通过对细胞活力的考察选择桔梗多糖合适的实验剂量梯度。
实验重复3次。
3. 桔梗多糖对 PC12 细胞增殖的影响(高、中、低浓度的桔梗多糖)。
4. 工作计划
查阅与桔梗药理作用和糖尿病脑病相关的文献,综述了桔梗对糖尿病脑病可能的治疗作用。
查阅与桔梗多糖、抗氧化和PC12细胞相关的文献,制定探讨桔梗多糖对H2O2诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)细胞损伤的保护作用的实验设计方案。
查阅了桔梗多糖作用于氧化应激损伤的PC12细胞的可能有效浓度范围。
5. 难点与创新点
查阅了桔梗多糖抗氧化活性的相关文献报道,在最近研究中,动物实验表明,桔梗多糖抗氧化活性可能是其具有降血糖作用的机制之一。
而其他的抗氧化的实验都没有进行体外细胞实验。
对于桔梗多糖是否能有效抑制氧化应激所致的神经元损伤,尚未见报道。
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