1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.本课题的意义
水飞蓟(Silybummarinum(L.)Gaertn)为菊科水飞蓟属植物,以其成熟的果实入药[1],具有清热解毒、疏肝利胆的功效,主要用于肝胆湿热、胁痛、黄疸等症。其果实中主要含有水飞蓟宾、脱氢水飞蓟宾、水飞蓟宁和水飞蓟亭、水飞蓟宾聚合物等水飞蓟素类化合物[2],其茎叶也含有黄酮类、氨基酸、生物碱等多种化合物[3]。现代药理研究证明,水飞蓟素与水飞蓟提取物具有稳定和保护肝细胞膜、改善肝功能、阻止肝损害、提高免疫力、抗疱疹病毒等功能[4-6]。水飞蓟原产于印度和巴基斯坦的喀什米尔山区,而后在欧洲、美洲及澳洲多个地区都有种植[7]。1952年,北京植物园从英国引进作观赏植物栽培,1972年,由中国土产畜产进出口公司天津土产分公司从德国引种作为药用植物栽培[8]。我国很多地方都已引种成功,目前主要在西北和华北栽培。随着国内制药企业对水飞蓟原药材需求的增加,近几年价格也有所上升。
水飞蓟耐严寒、耐盐碱、耐旱能力非常强,所以其对土壤要求并不严格,可利用盐碱地种植。我国的盐碱土面积较大,约3.5107hm2,相当于耕地占世界盐碱地的1/28左右。因此,利用大面积的盐碱地和丰富的咸水资源,对农业盐渍土的治理、开发以及提高植物的耐盐性、利用盐水资源等方面非常重要。土壤盐渍化是由于长期使用含有某些难溶性盐类的水灌溉或过度使用化肥造成的,一般认为无机盐中对植物危害最大的是钠盐,目前就有关植物抗盐生理的研究趋势而言,仍以中性盐NaCl为主要研究对象[9-12]。本课题以苗期水飞蓟为试验材料,研究不同时间的盐胁迫对水飞蓟的生理与活性成分含量的影响,为水飞蓟栽培生产中耐盐性提供理论依据。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究的目标
以苗期菊科植物水飞蓟为试验材料,采用浓度为100mmol.L-1NaCl溶液对水飞蓟进行不同时间NaCl胁迫处理(0d、1d、2d、3d、4d、5d,记为CK、T1、T2、T3、T4、T5),每个处理8株,3次重复。通过测定水飞蓟叶片中叶绿素含量(SPAD)、可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量,同时测定总黄酮、水飞蓟素含量,探究盐胁迫对水飞蓟幼苗生理生化及活性成分指标的影响,为盐胁迫下水飞蓟栽培生产的水分管理提供参考依据。
2.研究的内容
3. 研究的方法与方案
1.研究方法
(1)叶绿素含量(SPAD)的测定100mmol.L-1NaCl胁迫处理结束后的上午,取由里至外全展且无破损的第二轮叶片的中上部作为测定部位,用SPAD502叶绿素测定仪测定其SPAD值,每个处理测定10次。
(2)叶片中可溶性蛋白含量和可溶性糖含量a.采用考马斯亮蓝染色法测定叶片中可溶性蛋白含量。b.可溶性糖含量采用苯酚-硫酸法进行测定。
4. 研究创新点
特色或创新之处
目前关于水飞蓟的研究主要集中在化学成分、药理活性、制剂工艺、临床应用等方面,而关于不同NaCl胁迫时间对水飞蓟生理与活性成分的影响尚未见报道。不同的NaCl胁迫会对水飞蓟生理产生影响,进一步会影响活性成分积累。不同NaCl胁迫下苗期水飞蓟叶片中各种指标含量存在一定差异。对于盐胁迫下水飞蓟的相关研究仅见张晓倩等人水飞蓟萌发期和苗期对NaCl胁迫的生长生理响应的研究,和张鑫等人NaCl胁迫对水飞蓟有效成分影响的研究,对于不同NaCl胁迫条件的研究尚未见报道,为此本实验采用水培的方式,在上述研究的基础上,确定合适的NaCl胁迫浓度,以不同的NaCl胁迫时间为实验变量,研究其对苗期水飞蓟的生理及活性成分的影响。为水飞蓟在盐碱地栽培生产中提供理论依据。
5. 研究计划与进展
1.研究计划
本研究预期在17个月内完成,2015年1月-2016年5月。
2015年1月:进行前期工作,查找文献资料,完成研究方案的设计。
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