1. 研究目的与意义
内容:本课题主要用磁珠法和柱提法两种方法提取肿瘤游离DNA,接着进行一系列下游实验、对比数据,分析不同实验背景、环境下,磁珠法和柱提法提取的优势和劣势。
意义:随着现代生物学技术的不断发展,生物科学的研究成果得到了广泛的应用,而核酸作为生物体遗传信息的携带者,在生物的生长、发育、繁殖、衰老、病变和死亡等整个生命过程中均扮演着重要的角色,因此核酸不论是在农业生产领域,还是在工业领域,以及在疾病的检测和治疗、司法鉴定和生命科学研究等领域,都发挥着不可替代的作用,进而核酸的提取和纯化,作为进行核酸研究的首要步骤,就显得格外重要。
2. 文献综述
肿瘤游离提取方法的比较摘要: 从血浆中提取肿瘤游离DNA及定量、定性检测,进行磁珠法和柱提法提取游离DNA提取实验。
对磁珠法和离心柱提取的DNA效果进行分析,以便于寻找出符合需求的提取肿瘤游离DNA的理想方法。
关键词: 游离DNA 肿瘤 磁珠法 柱提法 血浆1.游离DNA概述血中游离DNA简称循环核酸,是循环血中游离于细胞外的部分降解了的机体内源性DNA。
3. 设计方案和技术路线
研究方案1.样本前处理1.1磁珠法:在1.5mL离心管中,加入20μL proteinase K。
然后加入200μL血浆至装有Proteinase K的离心管中,震荡摇匀5 s。
加入200 μL Buffer AL至样品中,涡旋混匀20 s。
4. 工作计划
18.09.0118.11.30查阅整理课题内容相关文献资料18.12.0119.02.10完成综述并了解实验相关内容19.02.1119.03.20熟悉课题研究方案并完成开题报告19.03.2119.04.30进行多组多次实验并收集实验数据19.05.0119.05.31整理实验结果撰写毕业论文
5. 难点与创新点
目前,肿瘤游离DNA的提取以及检测,不仅检测灵敏度高,特异性强,多靶标可排除假阳性,可以早期发现病变,并可以用于疾病的早期筛查;游离DNA的提取对肿瘤检测手段在肿瘤的普查和诊断中起着至关重要的作用。
市场上肿瘤游离提取试剂盒基本就两种方法:磁珠法和柱提法,但并没有统一的对比过。
这两种方法相对其他方法比较,经济实惠,提取便捷,成功率高。
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