1. 研究目的与意义
Taq DNA Polymerase[Taq DNA聚合酶(简称Taq酶)]是水生栖热菌 Thermus( Taq )中分离出的具有热稳定性的DNA聚合酶。
这对于PCR的应用有里程碑的意义,PCR循环的每一步对温度的要求都不一样,多数酶在高温时即变性失活,然而该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,所以不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷。
本文研究Taq霉的纯化和活性使得PCR技术更具准确性。
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2. 文献综述
文献综述Taq DNA Polymerase纯化方法及活性研究摘要 Taq DNA聚合酶是分子生物学研究中最常用的热稳定DNA聚合酶之一。
目的:研究Taq酶如何能够提高其纯度和活性。
方法:本实验基于已重新构建的Taq酶甘油菌加入氨苄抗生素过夜培养,将培养的细菌接入LB培养基,用异丙基硫代-β-D-乳糖苷诱导,后利用SDS-PAGE来测纯度,再使用提纯后的Taq酶来进行活性检测。
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3. 设计方案和技术路线
通过查阅文献和导师指导确定实验步骤:1、准备Taq酶甘油菌2、进行细菌的过夜培养3、离心粗纯化4、精纯化5、活性检测6、数据比较
4. 工作计划
第一阶段:查阅国内外文献第二阶段:根据文献提示和指导老师的指导,确定论文的题目以及完成实验路线的设计。
第三阶段:理清实验,进行实验第四阶段: 整理好实验数据,撰写论文,准备答辩。
5. 难点与创新点
Taq酶的纯度和活性更高,有助于PCR实验的准确性
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