1. 研究目的与意义
内容：1 泽泻萜类组分的制备（制备方法同实验室前期研究）2 泽泻萜类组分不同萃取部位的制备3 泽泻萜类组分不同萃取部位致HK-2细胞肾毒性的筛选3.1 MTT法测定细胞存活率3.2 CCK-8法检测细胞存活率3.3 FDA法检测细胞存活率4 UPLC/Q-TOF-MS辨析肾毒性成分意义：本课题组前期研究结果表明，泽泻萜类组分对HK-2和雌性大鼠存在潜在的肾毒性，但是对其产生肾毒性的物质基础尚不明确。
本课题主要的意义是在前期研究的基础上对泽泻萜类组分产生肾毒性的成分进行解析，为临床泽泻的用量提供参考。
2. 文献综述
肾毒性评价方法及检测指标的研究进展摘要：药物的肾毒性往往是候选药物被迫中断后续开发的主要原因之一，目前已经成为研究的热点。
通过检索万方、知网等中外数据库中有关中药肾毒性的研究文献，归纳了一些新的肾损伤相关生物标志物以及中药肾毒性评价方法并指出了其优势与可行性。
关键字：泽泻萜类、肾毒性、检测指标生物标志物是近年来随免疫学和分子生物学技术发展提出的一类与细胞生长增值有关的标志物，可以准确、敏感的评价脏器的早期损害，用于药物脏器毒性的早期预测。
3. 设计方案和技术路线
1 泽泻萜类组分的制备称取泽泻药材细粉 400 g，加入10倍体积 80% （体积分数）乙醇，煮沸30 min，滤过，滤渣中加入10倍体积80%乙醇，煮沸30 min，滤过，合并滤液，40 C减压热浓缩至2000 ml，得生药质量浓度为0.2 g/mL的样品溶液。
用AB-8大孔树脂柱处理，用70%（体积分数）乙醇洗脱，收集洗脱液。
2泽泻萜类组分不同萃取部位的制备70%洗脱液用分别用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，收集五份萃取液，挥干溶剂备用。
4. 工作计划
2022.01-2022.02泽泻萜类组分的制备2022.02-2022.03泽泻萜类组分的萃取及完成综述与开题报告2022.03-2022.04HK-2细胞培养及相关实验2022.04-2022.05UPLC/Q-TOF-MS检测及成分解析2022.05-2022.06完成毕业论文
5. 难点与创新点
1. 采用HK-2细胞对肾毒性成分进行筛选。
2. 多种检测细胞存活率的方法联合使用，提高了检测的准确性。
3. 为中药肾毒性成分筛选研究提高参考
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