巴豆蛋白致炎机制研究开题报告

 2023-01-03 15:18:43

1. 研究目的与意义

巴豆为大戟科植物巴豆Croton tiglium L. 的干燥成熟种子,性热,味辛。

归胃、大肠经。

具有峻下逐水的功效。

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2. 文献综述

肠道菌群与肠炎的相关性研究摘要炎症性肠病是病因不明的慢性肠道炎症性疾病,可能的病因包括由基因决定的宿主易感性、粘膜免疫和肠道微生态环境三者的相互作用,目前研究较多的是肠道菌群与肠炎发病的关系。

最近的一些研究表明,肠道微生态制剂(包括乳酸杆菌、双歧杆菌和酵母菌)对实验性结肠炎或人的肠炎可以产生有益影响。

迄今为止尚未发现特异的细菌与肠炎的发病相关,也未发现特征性的肠道菌群的变化,但是一些研究己使用多种方法发现肠炎患者和健康对照者的粪便细菌的不同。

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3. 设计方案和技术路线

研究方案:(一)巴豆蛋白的提取:1)购置四川宜宾道地药材巴豆。

2)巴豆总蛋白的提取:PH=7.2 0.01mol/L PBS提取,80%饱和硫酸铵沉淀总蛋白,透析除盐,冻干即得。

(二)肠道菌群的分离纯化采用脑-心浸液培养基(BHI),取小鼠粪便约2g,倒入含10ml无菌生理盐水的离心管内,用涡旋仪混合均匀,2000r/min离心10min。

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4. 工作计划

(一)通过查阅国内外文献了解消化道损伤过程中,肠道微生物菌群紊乱与肠炎的相关性研究进展,完成综述(已完成)。

(二)通过采用脑-心浸液培养基(BHI),取C57bl/6小鼠粪便约2g,倒入含10ml无菌生理盐水的离心管内,用涡旋仪混合均匀,2000r/min离心10min。

迅速取上清液,即为肠道细菌混悬液。

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5. 难点与创新点

课题组前期研究结果表明,巴豆蛋白具有消化道毒性并可引起剧烈的消化道腹泻,而这些毒性作用均与炎症反应密切相关。

因此,本论文从肠道微生物菌群与免疫的相关性研究为出发点,首次阐明了巴豆蛋白在诱导肠炎损伤过程中,首先可通过引起肠道菌群紊乱,诱导致病菌异常增长,进而导致肠炎的加剧,探讨了巴豆蛋白是否可协同肠道菌加剧肠炎反应的发生。

为巴豆蛋白的毒性作用机制奠定基础。

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