灵芝多糖的提取和含量测定开题报告

 2023-01-05 21:15:21

1. 研究目的与意义

内容:用水提醇法提取灵芝多糖,用还原糖法(DNS法)测定灵芝多糖含量意义:灵芝多糖的提取和含量测定方法多样化,各个方法的成效和结果不同,此次试验想在不同条件下提取灵芝多糖,已得到灵芝多糖提取与含量测定的最优条件。

2. 文献综述

灵芝多糖的提取方法和含量测定047212115杨铭祖南京中医药大学,药学院,南京摘要:目的:介绍目前实验室常用的灵芝多糖的提取和含量测定的方法。

方法:通过查阅相关文献,综述其提取和含量测定的研究概况。

结果:灵芝多糖的提取以水提醇法为主,并可在提取前对灵芝子实体采取预处理,多糖的含量测定方法主要有苯酚-硫酸法,还原糖法和萨氏法。

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3. 设计方案和技术路线

1胞内多糖的提取取全部发酵液在4000转/分条件下离心10min,收集上清液,沉淀用与发酵液同体积的蒸馏水洗涤2次并离心,手机合并3次上清液,沉淀物(菌丝体)称重(g,湿重),搅碎,按1:20/1:30/1:40/1:50加热水,于50/70/90℃热水浴中提取1/2次,每次1.5h,4000转/分条件下离心10min离心,收集合并两次上清液,于90℃(水浴锅)下真空浓缩至原体积的1/5,再将浓缩液置于透析袋中,流水透析2h,加1/2/3倍量95%的乙醇,4℃冰箱冷藏24h后,3000rpm离心15min,弃去上清液,沉淀用少量无水乙醇、丙酮分别洗涤,真空抽干,然后至于真空干燥箱中70℃进一步干燥2h,得到胞内粗多糖,称量,计算得率(%)2胞外多糖的提取将上清液减压浓缩至原体积的1/5,再将浓缩液置于透析袋中,流水透析2h,加入1/2/3倍量的95%的乙醇,4℃冰箱冷藏2h后3000rpm离心15min,沉淀物用无水乙醇、丙酮洗涤后,同上操作,得到胞外粗多糖,称重,计算得率(%)。

1还原糖的提取 准确称取3.00g灵芝多糖,放入100ml烧杯中,先用少量蒸馏水调成糊状,然后加入50ml蒸馏水,搅匀,置于50℃恒温水浴中保温20min,还原糖浸出。

将浸出液(含沉淀)转移到50ml离心管中,于4000rpm下离心5min,沉淀用20ml蒸馏水洗一次,再如上述条件进行离心,将二次离心的上清液收集在100ml量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,混匀,作为还原糖待测液(如隔次实验则置4℃冰箱中保存备用)。

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4. 工作计划

2022年1-2月:进行文献查阅,翻译和整理;2022年3-5月:进行灵芝的培养,灵芝多糖的提取和含量测定;2022年6月:撰写毕业论文。

5. 难点与创新点

随着对多糖的不断研究,越发地发现多糖本身结构复杂,且种类繁多,它的提取工艺和含量测定有一定的难度,有些天然植物里的多糖很少而且不容易分离提取,所以研究灵芝多糖的提取和含量测定很有挑战。

此外,灵芝作为中国传统药材一直受到世界的瞩目,灵芝多糖现已广泛应用于医疗保健行业,讨论和研究对灵芝多糖的提取和含量测定,使其今后的发展越来越好。

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