1. 研究目的与意义
内容:
1.通过二维电泳技术分离细胞中的蛋白,观察不同给药条件对癌细胞中蛋白质的影响。
2.经过对分离结果的分析,定位药物作用的蛋白位点,利用WesternBlot、质谱分析等方法分析该蛋白。
2. 文献综述
雷公藤甲素抗卵巢癌作用机制微探
符士源
摘 要:雷公藤甲素是被证实的药理作用较为广泛的中药活性成分,其抑制肿瘤的活性更为人们所关注。雷公藤甲素针对多种癌症都有较好的疗效,但对卵巢癌的治疗却鲜有报道。雷公藤甲素针对卵巢癌的治疗机制需要通过更加深入的研究来阐明,其合理的治疗方案仍需进一步探索。本文综合众多研究成果,简要阐述雷公藤甲素治疗卵巢癌的作用机制和雷公藤甲素的毒性研究。
3. 设计方案和技术路线
研究方案:
1.二维电泳
材料:试剂:标准蛋白混合液;上述细胞样品(1mg/mL);30%凝胶贮备液:丙烯酰胺(Acr),亚甲基双丙烯酰胺(Bis),双蒸水;分离胶缓冲液(1.5mol/L):Tris,双蒸水,6mol/LHCl;浓缩胶缓冲液(0.5mol/L):Tris,双蒸水,6mol/LHCl;电极缓冲液(pH8.3):SDS,Tris,Gly,双蒸水;10%SDS;质量浓度10%过硫酸铵(新鲜配制);上样缓冲液:0.5mol/LTris-HClpH6.8,甘油,10%SDS,β-巯基乙醇,0.1%溴酚蓝,双蒸水;0.25%考马斯亮蓝R-250染色液:考马斯亮蓝R250,50%甲醇,冰醋酸;脱色液:甲醇,冰醋酸与双蒸水混合;平衡液:1.5MTris-ClpH8.8,尿素,甘油,SDS,溴酚蓝(1%),双蒸水;平衡液A:每10ml平衡液 0.1gDTT,平衡液B:每10ml平衡液 0.25gIAA
4. 工作计划
第一阶段:开题准备阶段
2022.12022.2:理论学习、查阅资料,确定研究方向,完成选题;
2022.22022.3:查阅文献,撰写综述,提交开题报告。培养SKOV3细胞株,准备实验相关试剂、器材,技术学习和技能掌握。
5. 难点与创新点
1.立题的创新
卵巢癌是较为常见的妇科恶性肿瘤,严重影响了女性健康。卵巢癌一直是困扰着研究者和病患的一个重大难题。临床上治疗卵巢癌的方法不仅毒副作用大,易复发,而且已使癌细胞产生耐药性,其疗效日渐下降。学术界急需尽早发掘更好的治疗药物和治疗措施,以遏制卵巢癌对女性健康的危害。利用中医中药治疗肿瘤,是我国肿瘤治疗领域的一大特色。近年来,从天然植物中筛选抗癌药物和进行有关抗癌作用机制的研究成为一大热点。本研究旨在从传统中药中药理作用极为广泛的雷公藤中提取的活性物质雷公藤甲素着手,研究其抑制卵巢癌的作用机制,以期深刻探讨其作用靶点,为卵巢癌的治疗提供理论依据和研究基础。
2.研究方法的创新
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