1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
右旋糖酐蔗糖酶重组菌株构建及其催化合成右旋糖酐研究综述引言右旋糖苷一种葡萄糖聚合物,由聚合的葡萄糖分子数目不同而产生不同分子量的产品。
低分子右旋糖酐,可提高血浆胶体渗透压,增加血容量,减低血小板黏附性并抑制红细胞凝聚,降低血液黏稠度,降低周围循环阻力,疏通微循环。
可使肾有效滤过压及肾小球滤过率增加,在肾小管内发挥渗透性利尿作用。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
一 本课题要研究或解决的问题本课题的研究的主要内容是右旋糖酐蔗糖酶DSR-M2重组菌株构建及其催化合成右旋糖酐研究。
需要开展的实验研究内容有:1、质粒转化获得阳性重组菌株;2、菌株活化,筛选高活性菌株;3、对比LB和培养基3的产酶差别;4、酶催化考察200,250,300 g/L,酶添加量0.5,1和1.5 U/mL,对催化产物的影响。
二 研究手段1.质粒转化:大肠杆菌作为表达系统,用感受态法转化;2.菌株活化、筛选高活性菌株:以蔗糖为底物配置培养基,根据培养菌落直径筛选高活菌株;3.产酶:对照法,对比不同培养基下的产酶区别;4.酶催化:控制变量,用HPLC法测定产物分子量,考察该酶催化底物的转化率和产物的分子量,对催化产物的影响。
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