1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
本课题的意义小麦赤霉病是国内外小麦生产上的重要病害之一（Hou et al, 2011; Zhang et al, 2009），不仅造成小麦产量的严重损失，而且病菌产生的赤霉毒素（主要为DON）对人畜有毒害作用，威胁粮食安全和食品安全（Champeil et al, 2004; Bottalico Perrone, 2002）。
SANRE蛋白是一类在真核生物中十分保守的蛋白，在真核生物膜泡的运输和融合过程中具有重要的作用。
研究膜泡运输过程中SANRE蛋白FgVam7的结合蛋白FgVam6在禾谷镰刀菌中的生物学功能了解病原菌毒素产生机理及致病机制具有重要的意义。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标
阐明小麦赤霉病菌FgVam7结合蛋白FgVam6的生物学功能。
3. 研究的方法与方案
研究方法和实验方案
查找基因上下游的序列，分别选取ORF上下游1 kb左右作为基因同源重组的上下臂，上游引物分别加限制性酶切位点KpnI、XholI(M buffer)、下游为SpeI、SacI(M buffer)。通过扩增片段、PCR产物回收纯化后连接pMD19-T-simple载体(TaKaRa,Dalian,China),后经过4-6小时或过夜37℃酶切后（也可以PCR产物直接酶切），将产物回收通过T4连接酶再分别插入pCX63载体中潮霉素两端的多克隆酶切位点。
4. 研究创新点
特色或创新之处： 通过Split Marker PCR方法构建敲除载体可提高试验中获得突变体的概率。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展： （1）2014.92014.10设计引物，扩增上下臂； （2）2014.102014.11构建敲除/回复载体； （3）2014.112014.12原生质体转化筛选突变体； （4）2014.122015.1测定突变体相关生物学特征。
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