1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV) 是一种正单链 RNA病毒，大小为 30018nm 的直杆状病毒，属烟草花叶病毒属（ Tobamovirus）[1]。
CGMMV是世界上许多国家和地区葫芦科植物上的重要检疫性病毒，严重威胁着西瓜(Citrulluslanatus)、甜瓜（Cucumis melo）、黄瓜（Cucumis sativus Linn.）等葫芦科作物的生产。
常温下，该病毒的侵染力可保持数月，极易通过汁液传播，是典型的种传病毒，种子带毒是主要的远距离传毒方式[2]。
2. 研究的基本内容和问题
研究的最终目标是将得到的试纸条应用于田间样品检测。
研究内容：首先对CGMMV的CP蛋白序列进行分析并扩增，会扩增800bp左右大小的片段，选择原核表达的方式对扩增序列进行体外表达，得到30KD大小的蛋白，在对表达的蛋白进行纯化，用纯化的蛋白免疫小鼠，多次免疫后小鼠会产生CGMMV抗体，取其脾脏与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合，筛选出稳定分泌CGMMV抗体的杂交瘤细胞株系若干，再用得到的细胞株系制备腹水，纯化腹水得到CGMMV单抗，用胶体金标记其中一个纯化的单抗，用制备好的单抗，制备试纸条并优化试纸条使用条件。
拟解决的关键问题：能够筛选出稳定分泌CGMMV抗体的杂交瘤细胞株系若干
3. 研究的方法与方案
试验方法：蛋白原核表达、单克隆抗体制备、胶体金制备、试纸条制备技术路线：克隆CGNNV的CP基因，连接到合适的原核表达载体上。
制备大肠杆菌Rossetta感受态细胞。
将连又目的基因的载体质粒转入Rossetta感受态细胞中，大量表达蛋白。
4. 研究创新点
制备好的试纸条可应用于田间快速检测，也可用于检疫部门对出入境植物的检测等等，由于试纸条可在5-10min内显示检测结果，又省去了繁琐的步骤，可大大提升工作效率。
在病害普查方面，快速检测也为病害的防治起到非常重要的推动作用。
5. 研究计划与进展
2015年4月到2015年6月： 构建载体进行CGMMV-CP蛋白的原核表达及提纯工作。
2015年6月到2015年8月：免疫小鼠，得到鼠单抗。
2015年9月到2015年11月： 制备CGMMV-CP单克隆抗体。
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