细胞骨架作用药物对离体培养棉花胚珠纤维发育的影响开题报告

 2023-02-14 09:36:26

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

细胞骨架(cytoskeleton, CSK)是位于细胞膜内侧面的蛋白质丝纤维网架系统。

细胞骨架由微管(microtubule)、微丝(microfilament)和中间纤维 (intermediate filament)共同构成。

微管是长而不分枝、直径在25nm左右的管状纤维。

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2. 研究的基本内容和问题

研究的目标:初步了解不同微丝作用物质对微丝的影响,从而了解微丝对离体培养棉花纤维细胞骨架结构以及在纤维发育中的作用;初步了解微丝与微管两类不同骨架直接的联系和相互作用。

内容:通过一系列的药物实验,找出各类药物的最佳工作浓度,从而进一步了解微管和微丝在棉花纤维发育中的作用,获得转基因过表达和干扰表达棉花后研究villin的作用打下基础。

拟解决的关键问题:微管在棉花纤维发育中的作用研究比较多,而微丝的研究相对较少。

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3. 研究的方法与方案

研究方法:取TM-1和Li-1 的0 DPA胚珠为材料,以添加5μM IAA和0.5μM GA3的BT培养基为对照,进行胚珠离体培养,再分别添加Jasplakinolide、Cytochalasin D、Latrunculin B、Taxol、Oryzalin、DPI这些试剂,离体培养5~10天,观察胚珠及纤维发育情况,从而摸索各种药物对棉花培养胚珠的大致最佳作用浓度,进而缩小浓度变化范围,确定最佳的浓度范围。

技术路线:可行性分析:1、实验思路清晰,方案切实可行。

2、本实验室掌握此研究项目中的各项技术,能有效开展各项工作。

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4. 研究创新点

在棉花纤维发育过程中,微管的作用研究较多,但微丝的作用以及微丝和微管的相互作用研究较少,研究actin和microtubule对于纤维发育的作用,可以为获得转基因过表达和干扰表达棉花后研究villin的作用打下基础,同时该研究本身也可以用获得微丝和微管对纤维发育的直接效应。

5. 研究计划与进展

2015年6月2015年7月阅读相关文献,查询实验所需的药物的作用以及报道的工作浓度。

2015年8月2015年10月取TM-1和Li-1 的0 DPA胚珠为材料,以添加5μM IAA和0.5μM GA3的BT培养基为对照,再分别添加以下化学试剂,离体培养5~10天,观察胚珠及纤维发育情况。

摸索Jasplakinolide、Cytochalasin D、Latrunculin B、Taxol、Oryzalin、DPI各种药物对棉花培养胚珠的大致最佳作用浓度。

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