1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
本课题的意义：
由青枯劳尔氏菌（Ralstonia solanacearum）引起的青枯病是一种土传性维管束病害，病菌寄主范围包括50科200多种（卓涛, 2015）。由于病原菌易产生抗药性，化学防治一直未取得较好的防治效果，到目前位置，且易造成环境污染，而具有环境友好型的生物防治受到国内外学者的广泛关注。但是生物农药(特别是活体微生物农药)和化学农药在防治作用方式上是有本质区别的: 化学农药一般是直接、迅速地消灭某种靶标病原菌，但是同时也消灭了环境中的天敌和其他有益生物，使田间生物群落的自然控害作用受到严重抑制，在化学农药强大的选择压力下，日积月累促使病原菌产生抗药性，化学农药控害效果下降，有害生物的数量又快速回升，最终必然导致再次暴发新的、为害性更大的病害。生物防治就是利用有益生物资源,包括自然界或人工繁育的天敌昆虫、有益生物、病原微生物及其代谢产物和产品来控制与防治病虫害的方法与技术,即通常所说的"以虫治虫、以菌治虫".利用生物防治与生物农药防治病虫害,不仅其自然资源丰富,防治范围广,可就地取材,具有较好的防治效果,而且可显著减少农药施用,不污染环境与产品,对人畜安全,符合无污染、无公害食品、绿色食品乃至有机食品生产的要求。（武秀国，2016）当然，生物农药， 特别是活体微生物农药，受环境因子( 温度、 湿度、 光照等) 影响大，导致药效发挥不稳定，不像化学农药用量少、 见效快，特别是生产上发生暴发性和毁灭性病虫害时，生物农药难当重任。同时生物农药的货架期时间短，有效成分易降解、衰亡等，达不到化学农药 2 年的货架期指标(沈迎春，2011；杨新宁，2002)。
本课题是根据实验室现有菌株（蜡质芽孢杆菌 AR156、枯草芽孢杆菌 SM21 和粘质沙雷氏菌XY21），自己发酵制成NS混合菌液，通过不同货架期的微生物农药对番茄青枯病及其促生效果，探讨其不同储存时间对微生物防病促生效果的影响。为未来微生物施用时间以及货架期提供参考依据。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：
探讨NS最佳货架期，以及其防病促生效果。
研究内容：微生物肥料宁盾是一种三菌合剂，不污染环境，同时据具有防治作物病害，提高作物产量，提高作物的抗逆性等作用的环境友好型农药。但是我微生物农药随着储存时间活菌数逐渐降低，其功能会发生相应变化。为研究其防病的促生功能随储存时间的变化，本实验在番茄上进行试验，并且自己发酵后检测有效活菌数，在不同储存时间后按照一定浓度浇灌番茄，和接种青枯病病原菌，观察番茄生长情况和对青枯病的防治效果。根据其在番茄上效果，寻找最佳储存时间以及最总活菌浓度，为微生物储存时间研究提供理论基础。
3. 研究的方法与方案
研究材料与方法：
三菌产孢培养基制备及活化培养：分别制备三菌产孢培养基，并将放置于-70℃的超低温冰箱中三菌通过平板划线方法在LB平板上，28℃下培养18h活化；
种子液及三菌发酵液制备：挑取LB平板上单菌落，置于5mlLB试管中，在28℃，200转每分钟，培养16-18h成种子液。以1%的比例在相应大瓶（500ml/1000ml大瓶）中培养，28℃，200转每分钟，AR156、SM21培养30h，XY21培养24h，获得各自发酵液。
4. 研究创新点
本课题是根据实验室现有菌株（蜡质芽孢杆菌 AR156、枯草芽孢杆菌 SM21 和粘质沙雷氏菌XY21），自己发酵制成NS混合菌液，通过不同货架期的微生物农药对番茄青枯病及其促生效果，探讨其不同储存时间对微生物防病促生效果的影响。为未来微生物施用时间以及货架期提供参考依据。
5. 研究计划与进展
2016.07-2016.08 实验室基本试验操作学习，以及制备微生物菌剂及其各组合。
2016.08-2017.4 开展各组合菌剂不同是储存时间后对番茄防病促生温室实验
2016.4-2017.5 数据分析以及论文撰写
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