1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
长期以来,人们普遍关注激酶的功能及蛋白质的磷酸化过程,对其生物学功能及其分子调控机制进行了一系列研究,而对将蛋白质去磷酸化的磷酸酶研究较少。
近年来一些学者对蛋白质去磷酸化的研究中,发现磷酸酶在生物体中也具有重要的功能,磷酸酶与激酶一样在细胞信号网络的调控中发挥着不可或缺的作用。
传统意义上的蛋白磷酸酶家族主要分为三类:水解磷酸酪氨酸残基的酪氨酸蛋白磷酸酶、水解丝氨酸/苏氨酸残基的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶、识别并水解这两类残基的双特异性蛋白磷酸酶(DSPs)(Keyse, 1995)。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:阐明蛋白磷酸酶MoPtp1及MoPtp2在稻瘟病菌营养生长,分生孢子形成及致病过程中的生物学功能,解释MoPtp1及MoPtp2在调控稻瘟病菌应答外界氧化胁迫及细胞壁胁迫过程中的分子机制。
研究结果可望阐明MoPtp1及MoPtp2调控稻瘟病菌生长发育与致病的分子作用机制,同时对其他真菌的Ptps蛋白磷酸酶功能的解释具有重要指导价值。
研究内容:本项目将结合模式酵母研究成果和本实验室前期的工作,重点阐明稻瘟病菌蛋白磷酸酶MoPtp1及MoPtp2在稻瘟病菌的生物学功能。
3. 研究的方法与方案
研究方法:实验法 实验法是通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果联系的一种科研方法。
科学实验要求根据研究的需要,借助各种方法技术,减少或消除各种可能影响科学的无关因素的干扰,在简化、纯化的状态下认识研究对象。
实验以发现、确认事物之间的因果联系的有效工具和必要途径。
4. 研究创新点
特色与创新之处①立意新。
蛋白磷酸酶Ptp1及Ptp2在酿酒酵母的生长发育中具有重要的作用,但是其在丝状真菌中调控其生物学功能的分子机制尚未见报道。
本研究的开展将揭示稻瘟病菌MoPtp1及MoPtp2的生物学功能,阐明这两种蛋白应答氧化胁迫及细胞壁胁迫的机制。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展2016.9-2016.10 蛋白磷酸酶MoPtp1及MoPtp2敲除载体的构建;2016.11-2016.12获得MoPtp1及MoPtp2的敲除突变体;2016.12-2017.2MoPtp1及MoPtp2敲除突变体的生物学表型分析;2017.2-2017.3 数据分析及论文撰写
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